一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J
包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5
病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016
冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5
组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P
烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230
载玻片 Servicebio
正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683
二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418
EVG染液套装 Servicebio G1042
中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160
二、实验步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-
无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。
2、EVG染色:酒精苏木素:三氯化铁:碘液5:2:2混合成EVG染液,切片入EVG染
液染30 min,自来水冲洗。
3、背景分化:三氯化铁分化液稍分化一下,自来水洗一下,如此反复操作,在显微镜下
控制分化程度,至弹力纤维呈紫黑色,背景呈灰白色近无色。
4、复染VG:将饱和苦味酸与酸性品红9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,无水
乙醇三缸快速脱水。
5、透明封片:干净的二甲苯透明1-5min,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
三、结果判读:
弹性纤维呈紫黑色,胶原纤维为红色,背景为黄色。
四、注意事项:
1、分化时,至弹性纤维呈紫黑色的细丝状即可,不可过度分化,弹性纤维褪色,若分化不足,则VG复染后效果不佳;
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