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EVG染色观察弹性纤维胶原纤维实验报告-上海郑核

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详细说明

    一、实验器材及试剂

1、实验器材

名称 厂家 型号

脱水机 武汉俊杰电子有限公司 JJ-12J

包埋机 武汉俊杰电子有限公司 JB-P5

病理切片机 上海徕卡仪器有限公司 RM2016

冻台 武汉俊杰电子有限公司 JB-L5

组织摊片机 浙江省金华市科迪仪器设备有限公司 KD-P

烤箱 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 GFL-230

载玻片 Servicebio

正置光学显微镜 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系统 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要实验试剂

试剂名称 厂家 货号

无水乙醇 国药集团化学试剂有限公司 100092683

二甲苯 国药集团化学试剂有限公司 10023418

EVG染液套装 Servicebio G1042

中性树胶 国药集团化学试剂有限公司 10004160

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-

无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

2、EVG染色:酒精苏木素:三氯化铁:碘液5:2:2混合成EVG染液,切片入EVG染

液染30 min,自来水冲洗。

3、背景分化:三氯化铁分化液稍分化一下,自来水洗一下,如此反复操作,在显微镜下

控制分化程度,至弹力纤维呈紫黑色,背景呈灰白色近无色。

4、复染VG:将饱和苦味酸与酸性品红9:1混合成VG染液,染1-3min,快速水洗,无水

乙醇三缸快速脱水。

5、透明封片:干净的二甲苯透明1-5min,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。

三、结果判读:

弹性纤维呈紫黑色,胶原纤维为红色,背景为黄色。

四、注意事项:

1、分化时,至弹性纤维呈紫黑色的细丝状即可,不可过度分化,弹性纤维褪色,若分化不足,则VG复染后效果不佳;



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